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人尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1elisa試劑盒使用操作步驟

  • 發(fā)布日期:2023-03-22      瀏覽次數(shù):988
    •   人尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1elisa試劑盒是體內(nèi)重要的尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,對人體尿酸的代謝和排泄起著至關(guān)重要的作用。而人尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1ELISA試劑盒,能夠測試樣本中URAT1的濃度值,以評估其在人體中的功能和活性。該試劑盒是一種間接ELISA檢測方法,首先在板上涂覆已充分純化的URAT1抗原,與待測的樣本中的URAT1結(jié)合,然后加入一定濃度的URAT1檢測抗體,可與抗原中的URAT1發(fā)生特異性識別結(jié)合,生成V字形結(jié)構(gòu)。接著加入酶標(biāo)記二抗,二抗與URAT1檢測抗體結(jié)合,產(chǎn)生特異性抗體結(jié)構(gòu),用染色劑顯色從而得出樣本中的URAT1濃度值。
        
        人尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1elisa試劑盒具體步驟如下:
        
        1.準(zhǔn)備樣品:樣品分為細(xì)胞裂解液和真實(shí)樣本兩種。細(xì)胞裂解液需要進(jìn)行蛋白含量的測定,然后稀釋至相同濃度。真實(shí)樣本需要離心去除顆粒,不可稀釋。
        
        2.加樣:將標(biāo)準(zhǔn)品和樣品加入96孔板中,并配置蛋白降解液,經(jīng)加熱處理后靜置,使尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1能夠釋放出來。
        
        3.洗滌:將板子拍干,加入洗滌緩沖液,反復(fù)洗滌,使非特異性吸附物被清洗掉。
        
        4.孵育:加入專門抗尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1的抗體,然后加入二抗,進(jìn)行一定時(shí)間的孵育。
        
        5.二級結(jié)合:加入HRP標(biāo)記的抗體,進(jìn)行二級結(jié)合反應(yīng)。
        
        6.洗滌:反復(fù)洗滌,保證干凈無雜質(zhì)。
        
        7.顯色:添加TMB顯色液,進(jìn)行反應(yīng),最后加入停止溶液,讀取A值。
        
        通過對標(biāo)準(zhǔn)品的光密度與濃度關(guān)系的斜線確定樣本中尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1的濃度值,進(jìn)而據(jù)此得出實(shí)驗(yàn)樣本的尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1的表達(dá)水平和活性。
        
        總之,人尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1elisa試劑盒是一種可靠、高效的檢測試劑盒,可用于臨床檢測和研究中。
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